Испытательная Лаборатория «ОБУ Курская областная ветеринарная лаборатория» проводит испытания методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в реальном времени (qPCR)

Испытательная Лаборатория «ОБУ Курская областная ветеринарная лаборатория» проводит испытания методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в реальном времени (qPCR) для определения:

Актинобациллезной плевропневмонии свиней

Шаги для полной диагностики: ПЦР в реальном времени (qPCR) 

 

2022 06 02

 

Actinobacillus pleuropneumoniae

  • Актинобациллезная (актинобациллярная, гемофилезная) плевропневмония свиней - инфекционная болезнь, характеризующаяся развитием пневмонии и плеврита преимущественно в каудо-дорсальных областях легких. Термин "гемофилезная плевропневмония" применялся ранее и в настоящее время устарел, поскольку возбудитель в 1983 году был перемещен из рода Haemophilus в род Actinobacillus. Возбудитель - микроорганизм Actinobacillus pleuropneumoniae – грамотрицательная капсулообразующая плеоморфная палочка.
  • На сегодняшний день известно 2 биовара (подтипа) A. pleuropneumoniae, которые включают 16 серотипов микроорганизма. Все эти серотипы подразделяются на: высоко-, средне- и низковирулентные.
  • АПП широко распространена, заражает только свиней и не представляет опасности для здоровья населения, однако наносит огромный экономический ущерб свиноводству.

Почему ПЦР?

  • Специфичность данного микроорганизма и разделение на серотипы обусловлены различиями в строении капсульных полисахаридов и клеточных липополисахаридов (англ. lipopolysaccharides (LPS)). В связи с тем, что серотипы имеют похожую структуру длинноцепочечных OLPS, наблюдаются перекрестные реакции и трудности серологической дифференциации серотипов. Поэтому для окончательной идентификации применяется видоспецифичная полимеразная цепная реакция (ПЦР).
  • Патогенность A. pleuropneumoniae / клиническое проявление болезни обуславливают структурные клеточные элементы и белки, которые используются при диагностике и иммунопрофилактике заболевания. Одним из наиболее изученных внеклеточных продуктов являются цитолизины (токсины) Apx I, Apx II, и Apx III. Эти токсины являются важнейшим фактором патогенности A. pleuropneumoniae, обуславливая патологические процессы, наблюдаемые в организме животных (свиней). Токсин Apx IV экспрессируется в процессе инфицирования животных и, хотя не вызывает патологических изменений, используется для диагностики болезни.

Схема исследования методом ПЦР

  • Выявление ДНК АПП (Actinobacillus pleuropneumoniae);
  • Определение генов, кодирующих токсины, вырабатываемые App: Apx I, Apx III, Apx IV;
  • Идентификация ДНК Actinobacillus pleuropneumoniae (серотипы: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16) и ДНК Actinobacillus suis.

С какими образцами мы работаем?

  • Жидкость из ротовой полости;
  • Мазки и соскобы со слизистой из носа, ротоглотки и миндалин;
  • Фрагменты тканей и паренхиматозных органов павших или вынужденно убитых животных (миндалины, легкие, лимфоузлы).